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巴西无梗囊霉的形态与分子生物学鉴定

对贵州省梵净山国家自然保护区进行丛枝菌根真菌资源调查时,从梵净山冷杉( Abies fanjingshanensis) 和箭竹( Fargesia spathacea) 根际土壤中分离得到 1 种丛枝菌根真菌,通过形态学特征 18S rDNA AML1-AML2 区序列系统发育分析,鉴定其为巴西无梗囊霉( Acaulospora brasiliensis) ,为中国新记录种

丛枝菌根( AM) 真菌是一类能与 80%以上植物 共生的专性营养真菌,虽 AM 真菌-植物共生体 4 亿多年的协同进化,但相较于几十万种的 植物来说,AM 真菌物种数量极少[1]。目前全 AM 真菌共报 333 种,中国记录近两百种[2]

近年来,随分子生物学技术的广泛应用,每年约 10 个以上 AM 真菌新物种被鉴定报道[3] 梵净山国家自然保护区位于贵州省铜仁市,为 武陵山脉主峰,是首批国家级自然保护区和世界 然遗产。全区生态系统保存完好,基本未被人为

动,拥有高等植物 4 000 种,被认为是世界上同

度生物多样性保护最为完好的原始森林[

4]。为 明梵净山保护区丛枝菌根真菌的多样性及其分布 2017 年以来,本课题组连 3 年对梵净山进行 AM 真菌资源调查,目前已报 AM 真菌 42 种[

5-6 3 个中国新记录种[7],占国内报道物种数的 1 /4

说明该保护 AM 真菌资源极其丰富。现从梵净 冷杉( Abies fanjingshanensis) 和箭竹( Fargesia spathacea) 根际土壤中分离得 1 AM 真菌物种,通过形态学特征和系统发育分析,鉴定为我国新记录种

现予报道

1 样地概况 采样地位于贵州省铜仁市梵净山自然保护区 心区的烂茶顶

( 27°55'59.20″N,108°42'26.57″E) ,海拔 2 203 m,土壤类型为高山灌丛草甸土,气候冷 湿润,晴雨无常,年均 6 ℃,土层薄,层次发育较差,表层腐殖层较厚,土体风化度弱,pH = 4.5,土壤有机质质量分数 28.21%,岩石为半风化板岩,植 主要为箭竹和梵净山冷杉[8]

2 材料与方法

2.1 样品采

采集冷杉及箭竹的根际土壤。采样时,去除土壤表面约 3 cm 的腐殖土及杂质,采集距地 5 ~ 30 cm 的土层土壤, 1 kg 放入采集袋中,待土样自然风干后,置于冰箱 4 ℃保存以备用[9]

2.2 AM 真菌的分离鉴定采用湿筛倾注-蔗糖离心法[10]分离土壤中的AM 真菌孢子,于体视显微镜下对分离到的孢子进行观察及初步分类,再用无菌枪头将洗净后的孢子

吸取到载玻片上,以水 PVLG 为载浮剂,于生物显微镜( Olympus BX53) 和摄影系统( Olympus DP70) 下详细观察,记录孢子颜色、大小、形状、产孢子囊 孢子壁及发芽壁的层数和厚度及 Melzer’